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        产品列表PRODUCTS LIST

        首页>产品中心>支原体污染防治>支原体PCR检测>11-8025支原体PCR检测

        支原体PCR检测

        简要描述:

        VenorGeM支原体污染检测试剂盒(一步法)支原体PCR检测 采用常规PCR方法,并包含PCR需要的所有试剂。其中引物和dNTP、DNA聚合酶、内控对照都包含在PCR预混液(Mix)干粉中。重悬缓冲液复溶Mix干粉,分装到PCR管中,分别加入细胞上清(阴性对照)、复溶的阳性对照DNA和待测样品(细胞上清或提取的样本DNA),进行PCR反应。

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        常规PCR Kit (一步法)

        Venor®Gem OneStep

         

         

        品名

        货号

        规格

        价格

        常规PCR Kit (一步法)

        Venor®Gem OneStep

        11-8025

        25次/盒

        询价

        11-8050

        50次/盒

        询价

        11-8100

        100次/盒

        询价

        11-8250

        250次/盒

        询价

         

         

        常规PCR法介绍

        常规PCR法:是根据支原体核糖体16s-23s rRNA的特异保守序列设计引物,对待检样本DNA进行扩增,通过对扩增产物的大小分析作出诊断。

        优点:①灵敏度高,特异性好。②时间短,2-3小时出结果。③符合欧洲药典。④操作简单。

        缺点:①对于已做支原体灭活处理的样品,由于支原体DNA仍旧存在其中,PCR结果会出现假阳性。(可用培养法做补充验证)。②不同厂家生产的试剂盒质量差异巨大(由于引物及内在设计不同),需谨慎选择,尽量在专业人员推荐指导下使用。

         

        『支原体常规PCR检测试剂盒』介绍

        德国MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒,依据操作步骤的细微差别,分一步法和经典法两类。此两类试剂盒较全球其他厂家同类产品,具有以下独特的优点:

        ①高特异性,270bp左右的一条阳性对照条带,涵盖了所有可能感染细胞的支原体物种,操作简单,结果易于观察。(使用MB的试剂盒,下表列出的支原体物种均为阳性,其他微生物或真核细胞均为阴性。根据16s rRNA序列的同源性比对,该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。)

         

        ②高灵敏度,1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。

        ③试剂盒含内控对照,可防止假阴性的发生。

        ④符合欧洲药典要求。

         

        适用范围

        <!--[if !supportLists]-->A. <!--[endif]-->科研用户,细胞上清的筛查可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒(一步法)。(详见下文)

        Venor® Gem OneStep (货号:11-8050)】或Venor® Gem Advance (货号: 11-7096)】

         

        B. 对于需遵循药典要求的生物制药企业,可选用MB公司生产的支原体常规PCR检测试剂盒(经典法)。

        Venor® Gem Classic(货号: 11-1050) 】+ Taq酶  (货号: 53-1050)】

        或【Venor® Gem Classic  (货号: 11-1050G)】

         

         

         

        特点

        1. 内控对照已加在预混液中,无需另外配置,使用便捷。
        2.高特异性,仅一条阳性对照条带,即可涵盖所有可能感染细胞的支原体物种。

        操作简单,易于观察。

        3.高灵敏度,1-5拷贝/μl的支原体DNA即可检出。
        4.欧洲药典要求的26种支原体均可检出。该试剂盒可检测出1种脲原体、7种无胆甾原体和85种支原体。

         

        操作步骤

        下列图示以Venor® Gem OneStep?支原体?常规PCR?检测试剂盒?(一步法)( 货号:11-8050)  为例,具体产品操作以说明书为准。

        1步:样本处理

         

         

        2步:试剂制备

         

         

        3步:PCR体系建立

         

         

        4步:启动PCR反应

         

         

        5步:电泳结果分析

         

        191bp为内控对照条带,表明PCR反应正常。

        当样本存在支原体污染时,由于内控对照与支原体DNA存在竞争,内控对照条带变弱(例如支原体DNA>103拷贝)。

        阳性对照中支原体DNA>104拷贝,内控对照条带会完全消失。

        可能在80-90bp存在引物自退火形成的条带,此条带不影响检测结果。

        如果待测样本对PCR产生抑制,则内控对照条带变弱(和阴性对照相比),此时应先进行DNA抽提(推荐使用:Venor® Gem Sample Preparation Kit 支原体DNA抽提试剂盒),然后再检测。

         

        储存条件

        2~8℃至少12个月。复溶后必须在-18℃保存。

         

        效期

        1年6个月

         如果你对11-8025支原体PCR检测感兴趣,想了解更详细的产品信息,填写下表直接与厂家联系:

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